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丹参多酚酸盐抑制库普弗细胞活化减轻肝脏再灌注损伤
Salvianolate ameliorates warm hepatic ischemia reperfusion injury by inhibiting Kupffer cells activation

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DOI:
作者:
郭闻渊 滕飞 宋少华 刘芳 王正昕 丁国善 傅志仁
作者单位:
第二军医大学附属长征医院器官移植科,上海,200003
关键词:
丹参多酚酸盐 抑制 巨噬细胞活化 肝脏再灌注损伤 Kupffer cells 库普弗细胞 表达水平 肝组织形态学 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞表面分子 TNF-α 检测血清 荧光定量反转录 血清丙氨酸转氨酶 酶联免疫吸附试验 保护作用 mRNA 天冬氨酸转氨酶 肝脏缺血再灌注 肿瘤坏死因子
摘要:
目的 研究丹参多酚酸盐(SV)对肝脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 选择健康、雄性的C57BL/6小鼠24只,随机分为假手术组、0.9%氯化钠溶液(NS)组和SV组,每组8只.假手术组小鼠仅接受开腹及关腹操作,NS组和SV组小鼠建立IR模型.IR术前1 h,SV组小鼠经尾静脉注射SV60 mg/kg,NS组小鼠注射等量NS.再灌注6 h,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,并观察肝组织形态学的变化.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清及肝组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的表达水平;应用免疫组织化学技术检测各组肝脏标本内库普弗细胞特异性抗原F4/80的表达情况,采用荧光定量RT-PCR检测库普弗细胞表面分子CD11b mRNA的表达水平.分离小鼠腹腔巨噬细胞,以脂多糖(LPS)作为活化剂,TNF-α作为巨噬细胞活化指标,检测体外培养体系中SV能否抑制巨噬细胞活化.结果 与NS组相比,SV组再灌注6 h的血清ALT、AST水平显著降低(P值均＜0.01),血清TNF-α和IL-6表达水平显著降低(P值分别＜0.05、0.01),肝组织内TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达水平亦显著降低(P值均＜0.05),肝组织内F4/80阳性库普弗细胞的浸润显著减少(P＜0.05),肝组织内库普弗细胞表面分子CD11b mRNA的相对表达水平显著降低(P＜0.05).SV体外抑制腹腔巨噬细胞活化实验显示,SV组的上清液内TNF-α水平显著低于NS组(P＜0.05).结论 SV对肝脏IR损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肝脏再灌注后库普弗细胞的活化有关.

 

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